Western Blot

简介:

蛋白质印迹的发明者一般认为是美国斯坦福大学的乔治·斯塔克(George Stark)。在尼尔·伯奈特(Neal Burnette)于1981年所著的《分析生物化学》(Analytical Biochemistry)中首次被称为Western Blot。蛋白免疫印迹( Western Blot) 是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术,现己广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。

原理:

与Southern Blot或Northern Blot杂交方法类似,但Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。

Western Blot显色的方法主要有以下几种:

i. 放射自显影

ii. 底物化学发光ECL

iii. 底物荧光ECF

iv. 底物DAB呈色

现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色,体同水平和实验条件的是用第①种方法,发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行,操作也比较简单,原理如下(二抗用HRP标记):反应底物为过氧化物+鲁米诺,如遇到HRP,即发光,可使胶片曝光,就可洗出条带。

服务内容：

1)客户提供蛋白的背景资料，包括蛋白的浓度、大小、是否膜蛋白，定性还是定量检测等。

2)客户提供一抗(标明来源和稀释度)，能同时提供阳性标本，如果需定量分析，还需提供内参抗体(亦可由我们提供)。

3)根据客户提供的资料，我们对全部工作进行评估设计，签订技术服务合同。根据需要，我们可进行蛋白提取、电泳，转膜、显色、拍照等一系列操作。整套工作完成后，为客户提供完整的试验报告(包括实验相关数据、数码照片等)。

服务优势：

1）高质量的产品支持:以国内外知名公司的 Westem blot试剂盒及相关产品为支持，极大地提高检测的灵敏度，且操作简单快捷，可在短时间内完成 Western blot检测。

2）检测灵敏度高:可检测到低至 10-100 pg的目的蛋白。

3）整体化服务: 免疫沉淀(IP)或免疫共沉淀 (Co-IP)和 Westen blot结合是研蛋白相互作用的有力工具，我们竭诚为您提供合理的实验设计和优质的技术服务。

4）经验主富:本公司通过 Western方法检测蛋白超过 500种。

服务价格：

询价  13672155269（王康）